組織培養(yǎng)前實驗室設(shè)計
在進(jìn)行植物組織培養(yǎng)工作之前,首先應(yīng)對工作中需要哪些最基本的設(shè)備條件有個全面的了解,以便因地制宜地利用現(xiàn)有房屋,或新建、改建實驗室。實驗室的大小取決于工作的目的和規(guī)模。以工廠化生產(chǎn)為目的,實驗室規(guī)模太小,則會限制生產(chǎn),影響效率。在設(shè)計組織培養(yǎng)實驗室時,應(yīng)按組織培養(yǎng)程序來沒計,避免某些環(huán)節(jié)倒排,引起日后工作混亂。植物組織培養(yǎng)是在嚴(yán)格無菌的條件下進(jìn)行的。要做到無菌的條件,需要一定的設(shè)備、器材和用具,同時還需要人工控制溫度、光照、濕度等培養(yǎng)條件。
實驗室設(shè)計原則:保證無菌操作,達(dá)到工作方便,防止污染。
實驗室組成:化學(xué)實驗室、洗滌菌室、無菌操作室(接種室)、培養(yǎng)室、細(xì)胞學(xué)實驗室、其他小型儀器設(shè)備。
1) 化學(xué)實驗室(準(zhǔn)備室):完成所使用的各種藥品的貯備、稱量、溶解、配制、培養(yǎng)基分裝等。
主要設(shè)備:藥品柜、防塵櫥(放置培養(yǎng)容器)、冰箱、天平、蒸餾水器、酸度計及常用的培養(yǎng)基配制用玻璃儀器.
2) 洗滌、滅菌室:完成各種器具的洗滌、干燥、保存、培養(yǎng)基的滅菌等。
主要設(shè)備:水池、操作臺、高壓滅菌鍋、干燥滅菌器(如烘箱)等。
3) 無菌操作室(接種室):主要用于植物材料的消毒、接種、培養(yǎng)物的轉(zhuǎn)移、試管苗的繼代、原生質(zhì)體的制備以及一切需要進(jìn)行無菌操作的技術(shù)程序。
主要設(shè)備:紫外光源、超凈工作臺、消毒器、酒精燈、接種器械(接種鑷子、剪刀、解剖刀、接種針)等。
接種室宜小不宜大,一般7~8平米,要求地面、天花板及四壁盡可能密閉光滑,易于清潔和消毒。配置拉動門,以減少開關(guān)門時的空氣擾動。接種室要求干爽安靜,清潔明亮。在適當(dāng)位置吊裝1~2盞紫外線滅菌燈,用以照射滅菌。最好安裝一小型空調(diào),使室溫可控,這樣可使門窗緊閉,減少與外界空氣對流。接種室應(yīng)設(shè)有緩沖問,面積1m2為宜。進(jìn)入無菌操作室前在此更衣?lián)Q鞋,以減少進(jìn)出時帶入接種室雜菌。緩沖間最好也安一盞紫外線滅菌燈,用以照射滅菌。
4) 培養(yǎng)室:培養(yǎng)室是將接種的材料進(jìn)行培養(yǎng)生長的場所。培養(yǎng)室的大小可根據(jù)需要培養(yǎng)架的大小、數(shù)目、及其他附屬設(shè)備而定。其設(shè)計以充分利用空間和節(jié)省能源為原則。高度比培養(yǎng)架略高為宜,周圍墻壁要求有絕熱防火的性能。
培養(yǎng)材料放在培養(yǎng)架上培養(yǎng)。培養(yǎng)架大多由金屬制成,一般設(shè)5層,最低一層離地高約lOcm,其他每層間隔30cm左右,培養(yǎng)架即高1.7m左右。培養(yǎng)架長度都是根據(jù)日光燈的長度而設(shè)計,如采用40W日光燈,則長1.3m,30W的長lm,寬度一般為60cm。
培養(yǎng)室最重要的因子是溫度,一般保持在20—27℃左右,具備產(chǎn)熱裝置,并安裝窗式或立式空調(diào)機。由于熱帶植物和寒帶植物等不同種類要求不同溫度,最好不同種類有不同的培養(yǎng)室。
室內(nèi)濕度也要求恒定,相對濕度以保持在70%~80%為好,可安裝加濕器。控制光照時間可安裝定時開關(guān)鐘,一般需要每天光照10-16h,也有的需要連續(xù)照明。短日照植物需要短日照條件,長日照植物需要長日照條件。現(xiàn)代組培實驗室大多設(shè)計為采用天然太陽光照作為主要能源,這樣不但可以節(jié)省能源,而且組培苗接受太陽光生長良好,馴化易成活。在陰雨天可用燈光作補充。
主要設(shè)備:培養(yǎng)架(控溫控光控濕)、搖床、培養(yǎng)箱、紫外光源等。
5) 細(xì)胞學(xué)實驗室:用于對培養(yǎng)物的觀察分析與培養(yǎng)物的計數(shù)等。主要設(shè)備:雙筒實體顯微鏡、顯微鏡、倒置顯微鏡等。
6) 其他小型儀器設(shè)備:分注器、血球計數(shù)器、移液槍、過濾滅菌器、電爐等加熱器具、磁力攪拌器、低速臺式離心機等。